um指的是膜孔徑,而從上面膜的生產(chǎn)過(guò)程,我們可以看出,膜的孔徑實(shí)際上是沒(méi)有辦法界定的.由于干燥成型等過(guò)程的非絕對(duì)均一,膜的孔徑也是非均一的.膜孔徑的說(shuō)法實(shí)際上是沿用了一直以來(lái)的一個(gè)形象稱呼.而以秒為單位的定義為,每4cm膜,水的層析時(shí)間是***s.該單位已經(jīng)越來(lái)越被各大廠商所接受,成為了一個(gè)通用的比較標(biāo)準(zhǔn).以下我們將采用s單位來(lái)進(jìn)行交流.
換算情況大致為: 8um=135s; 6um=180s.
不同秒數(shù)的膜對(duì)反應(yīng)有什么影響呢?
首先,我們分析一下液體在膜上的運(yùn)動(dòng)過(guò)程. 一張長(zhǎng)度為4cm的膜, 每隔1cm做一個(gè)標(biāo)記, 當(dāng)液體運(yùn)動(dòng)過(guò)標(biāo)記處時(shí)記錄時(shí)間點(diǎn). 那么你將會(huì)發(fā)現(xiàn)液體在膜上的運(yùn)動(dòng)是呈減速前行的. 而兩張不同秒數(shù)的膜(例如135s, 180s)在同一時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)處的運(yùn)動(dòng)速度不同.這個(gè)試驗(yàn)用清水做不好觀察,可以考慮用色素水溶液,非常明顯.
那么從這個(gè)試驗(yàn)可以看出,在通過(guò)同一T線噴點(diǎn)位置時(shí), 金溶液通過(guò)的速度是快速膜大于慢速膜. 那么通過(guò)速度越快和包被在T線的物質(zhì)反應(yīng)時(shí)間也就越短, 讀數(shù)快, 那么靈敏度也就越低. 反之, 反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng), 讀數(shù)慢, 也就靈敏度高. 同時(shí)還有一個(gè)問(wèn)題是, 反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng), 發(fā)生非特異性結(jié)合的可能性就越大, 所以過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的反應(yīng)不一定就能夠真正的提升靈敏度. 所以這里就有一個(gè)讀數(shù)時(shí)間/反應(yīng)靈敏度/非特異性結(jié)合的均衡.
其實(shí)我們并沒(méi)有那么多選擇. 經(jīng)過(guò)使用實(shí)踐, 各供應(yīng)商一般都只提供兩個(gè)型號(hào), 就是135s和180s. 雖然看到有些廠家的產(chǎn)品目錄上型號(hào)種類(lèi)繁多,但這兩個(gè)型號(hào)的定貨量就占了95%以上, 其他型號(hào)供貨上也就遠(yuǎn)不如這兩個(gè)型號(hào)來(lái)得順利. 135s一般用在雙抗體夾心法, 180s一般用在競(jìng)爭(zhēng)法. 你所要做的是,先選擇其中的一個(gè)型號(hào), 然后比較不同供應(yīng)商同一個(gè)型號(hào)的差異, 由于前面說(shuō)的添加配方與你的試驗(yàn)條件配合的不同,這個(gè)差異可能大也可能小. 具體要根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果來(lái)確定最后的選擇.
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