水稻microRNA的效應(yīng)復(fù)合體和靶標(biāo)
2009年11月10日,北京生命科學(xué)研究所戚益軍實(shí)驗(yàn)室在The Plant Cell雜志在線發(fā)表題為“水稻microRNA的效應(yīng)復(fù)合體和靶標(biāo)”的研究論文。該論文報(bào)道了水稻中microRNA (miRNA)效應(yīng)復(fù)合體的生化特性,并在基因組水平系統(tǒng)分析了受miRNA調(diào)控的靶標(biāo)基因。
miRNAs是一類在真核生物中廣泛存在的,可以調(diào)控靶標(biāo)基因表達(dá)的非編碼RNAs。miRNAs通過與Argonaute蛋白結(jié)合后形成基因沉默效應(yīng)復(fù)合體,切割靶標(biāo)mRNA或抑制其翻譯。水稻(Orzya_sativa)編碼四個(gè)Argonaute1同源基因(AGO1a, AGO1b, AGO1c, and AGO1d)。戚益軍實(shí)驗(yàn)室利用RNAi方法同時(shí)敲除了水稻的四個(gè)AGO1基因,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株具有復(fù)雜的發(fā)育表型,并且許多miRNAs的靶標(biāo)基因表達(dá)量上升。作者純化了其中三個(gè)AGO1復(fù)合體,AGO1a,AGO1b,和AGO1c。研究發(fā)現(xiàn)這三個(gè)AGO1蛋白都具有切割mRNA的活性,并且它們都對(duì)U 起始的小分子RNA具有偏好性。作者進(jìn)一步克隆了與AGO1結(jié)合的小分子RNAs并進(jìn)行高通量測(cè)序,發(fā)現(xiàn)AGO1s主要結(jié)合已知的miRNAs,而且大部分miRNAs均勻地分配到每一個(gè)AGO1中,表明這些AGO1s具有功能上的冗余性。同時(shí),該研究還發(fā)現(xiàn)了一部分miRNAs只進(jìn)入其中某一個(gè)或某兩個(gè)AGO1蛋白,說(shuō)明這些AGO1s在功能上也具有一定的特異性。本研究還對(duì)水稻MiRNAs的標(biāo)靶基因進(jìn)行了全基因組水平的分析和驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)這些目標(biāo)靶基因編碼包括參與重要發(fā)育的轉(zhuǎn)錄因子和參與其它各種生理過程的蛋白,揭示了miRNAs在水稻生長(zhǎng)發(fā)育過程中發(fā)揮著非常重要而廣泛的作用。
北京生命科學(xué)研究所博士研究生武亮,技術(shù)員張青青和周環(huán)宇為該文章的共同*作者,論文的其他作者還有倪方銳和鄔雪影。戚益軍博士為本文的通訊作者。此項(xiàng)研究為科技部863計(jì)劃和北京市科委資助課題,在北京生命科學(xué)研究所完成。
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